透射电子显微镜检测

　　透射电镜是一种高分辨率、高放大倍数的显微镜，是材料科学研究的重要手段，能提供极微细材料的组织结构、晶体结构和化学成分等方面的信息。透射电镜的分辨率为0.1～0.2nm，放大倍数为几万～几十万倍。

　　透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2um的细微结构，这些结构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构，就必须选择波长更短的光源，以提高显微镜的分辨率。1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜，电子束的波长要比可见光和紫外光短得多，并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比，也就是说电压越高波长越短。目前TEM的分辨力可达0.2nm。

　　透射电镜制备注意事项(细胞)：

　　1、细胞数量:> 1*10的6次方;。

　　2、消化细胞时要注意不要过度，及时用含血清的培养液终止消化;

　　3、终止消化后，预冷的PBS (pH7.4 )洗细胞1-2次，离心( 1500rpm, 5min) 弃上清(细胞收集在1.5ml 的EP管中);

　　4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制该溶液)，可用吸管轻轻吹散细胞，使细胞悬浮于固定液中;

　　5、4度固定过夜后寄出(寄送时加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液将EP管中剩余空间充满)。

　　透射电镜实验流程：

　　1、取材

　　2、固定

　　3、脱水

　　4、包埋

　　5、固化

　　6、超薄切片机切片(50-60 nm)

　　7、3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色

　　8、透射电镜观察，拍片